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适读人群 :《流式细胞术——原理、操作及应用(第二版)》特别适合于免疫学研究者和流式细胞术的初学者,也可以作为有一定经验的操作者的参考书,对其他领域研究者也具有很好的参考价值。
《流式细胞术:原理、操作及应用(第二版)》特色:
深入浅出,通俗易懂
著者对流式细胞术有着丰富的操作经验和深入透彻的理解,用最平实的语言诠释了此技术的原理、操作和应用。
方法全面,技巧突出
本书全面介绍了流式细胞术的基本操作方法,特别突出了著者的心得体会和技巧,帮助读者进一步提高操作水平。
理论联系实践本书
运用大量的实例和示意图具体而形象地阐述了流式细胞术的原理和应用。以其在免疫学上的应用为基础,扩展到基础医学和生物学应用的多个方面。
强化流式分选
本书还重点介绍了流式分选的具体应用,阐述了不同条件下流式分选的策略选择和注意事项,以及各种干细胞包括肿瘤干细胞等的流式分选。
内容简介
《流式细胞术——原理、操作及应用(第二版)》主要介绍流式细胞术的原理、操作及应用,分为概述、流式细胞仪的原理、流式图、流式细胞术的基本操作与技巧、流式分析术的应用和流式分选术的应用6个部分。概述部分介绍基本概念和几款常见的流式细胞仪;原理部分具体介绍流式细胞仪的液流系统、光路系统、检测分析系统和分选系统;流式图部分主要介绍了流式通道、流式直方图、流式散点图和流式等高线图;操作部分介绍了样品制备、荧光素偶联抗体及标记、光电倍增管电压设定、对照设置、补偿调节、阈值设定、死细胞问题处理、分选模式选择、上样速度控制、分选设门原则、分选基本步骤等内容;流式分析术的应用部分具体介绍了流式细胞术在免疫学方面的应用,并且扩展到基础医学和生物学方面的应用;流式分选术的应用部分阐述了不同条件下流式分选的策略选择和注意事项,同时还介绍了各种干细胞包括肿瘤干细胞等的流式分选方法。
章节目录
序
前言 v
1概述 1
1.1流式细胞术基本概念 2
1.2分析型流式细胞仪介绍 5
1.3分选型流式细胞仪介绍 9
参考文献 13
2流式细胞仪的原理 14
2.1液流系统 15
2.2光路系统 18
2.3检测分析系统 28
2.4分选系统 31
参考文献 36
3流式图 37
3.1流式通道 38
3.2流式直方图 39
3.3流式散点图 42
3.4流式等高线图 45
参考文献 46
4流式细胞术的基本操作与技巧 48
4.1样品制备 49
4.1.1独立细胞样品制备 49
4.1.2免疫器官样品制备 51
4.1.3实体脏器样品制备 52
4.2荧光素偶联抗体及其标记方法 53
4.2.1荧光素 53
4.2.2荧光素偶联抗体 57
4.2.3样品封闭 58
4.2.4荧光素偶联抗体标记 60
4.3光电倍增管电压设定 62
4.4对照的设置 65
4.4.1阴性对照的设置 65
4.4.2FMO对照 68
4.4.3阳性对照的设置 68
4.5补偿调节 69
4.5.1补偿调节的原理 69
4.5.2调节补偿的具体方法 71
4.5.3三色和四色分析补偿调节方法 74
4.5.4影响补偿大小的因素 76
4.6阈值设定 78
4.7流式分析中的死细胞问题 79
4.7.1减少样品中死细胞比例的方法 79
4.7.2流式分析时区分死细胞和活细胞的方法 80
4.8流式分选模式选择 85
4.8.1纯化模式 86
4.8.2富集模式 87
4.8.3单细胞模式 87
4.9上样速度控制 88
4.9.1流式分析速度控制 89
4.9.2流式分选速度控制 89
4.10分选设门基本原则 91
4.11流式分选基本步骤 93
参考文献 94
5流式分析术的应用 96
5.1细胞群比例测定 97
5.2表型测定 101
5.3流式检测细胞因子 106
5.3.1胞内染色法检测细胞因子 107
5.3.2胞内染色法与ELISA法比较 112
5.3.3CBA法测定细胞因子 114
5.3.4CBA法与ELISA法比较 116
5.4检测细胞增殖 117
5.4.1相对计数法 118
5.4.2示踪染料标记法 122
5.4.3Brdu标记法 127
5.4.4其他方法 129
5.5检测细胞凋亡 130
5.5.1Annexin Ⅴ/PI双染色法 131
5.5.2SYTO/PI双染色法 133
5.5.3细胞DNA含量分析法检测细胞凋亡 134
5.5.4线粒体损伤检测法 135
5.5.5活化的caspase-3检测法 139
5.5.6荧光素偶联的caspase抑制剂(FLICA)标记法 139
5.5.7甲酰胺诱导ssDNA单抗检测法 140
5.5.8TUNEL法 141
5.6检测细胞周期 142
5.6.1非特异性核酸荧光染料标记法 142
5.6.2特异性细胞周期调节蛋白检测法
流式细胞术——原理、操作及应用(第二版)是2014年由科学出版社出版,作者曹雪涛。
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