编辑推荐
围绕医学实验技术的设计和操作中实际遇到的与实验设备与仪器、实验试剂、实验步骤、结果的整理与分析等相关的各种问题，展现作者在实验过程从最初的迷惑到最终的收获与体会的真实经历。
内容简介
目前，各研究单位、高校和医院对科学研究越来越重视，对SCI论文、课题及成果的要求也水涨船高，而这一切往往都依赖于一个又一个的实验。作为科研主力军的研究生们整天挣扎在实验室中，为了拿到满意的实验结果而废寝忘食。实验技术的设计和操作是一个不断探索与总结的实践过程，即使是参考书或文献中看似非常成熟的操作技术，我们都有可能怎么也得不到预期的结果。在这些实践和探索过程中的每一个细小环节的盲点都可能导致我们一筹莫展，每一个细小环节都值得我们深入地探究和总结。
在实验过程中，我们常常会碰到诸多“困惑”，在消除困惑的过程中，又必然会或多或少有一些“心得与收获”。常言道：“失败是成功之母”。实验一线的科研人员几乎个个都有失败的经历，都曾而对着一个又一个困惑……那么，如何才能从这些困惑中寻找到“柳暗花明又一村”的解决方案，去收获成功呢？《实验技术中的“惑”与“获”》旨在将科研工作者们在实验过程中的“困惑”和“收获”汇集成册，以启示后来人，让他们在今后的科学实验中少走弯路。
章节目录
版权信息
编委（以姓氏笔画为序）
其他参与编写人员（以姓氏笔画为序）
序
前言
第一篇 核酸技术
第一章 DNA提取和鉴定技术
第一节 如何获得高产量DNA
第二节 乙醇沉淀核酸中盐的作用
第三节 核酸抽提中乙醇洗涤的作用
第四节 DNA的聚丙烯酰胺凝胶电泳银染
第五节 荧光素酶双报告基因中调节目的质粒与内参质粒比例是关键
第二章 RNA提取技术
第一节 如何提高RNA提取质量
第二节 如何提高总RNA纯度和产量
第三节 RNA纯度对荧光定量RT-PCR准确性的影响
第四节 组织反复冻融易致RNA降解
第五节 谁动了我的细胞RNA
第三章 质粒提取和构建技术
第一节 质粒DNA提取实验的细节深究
第二节 质粒DNA电泳有几条带
第三节 质粒构建
第四节 灵活酶切以玩转克隆
第五节 分子克隆方法——细节决定成功
第四章 PCR技术
第一节 以V2R为例设计引物并使用BLAST验证
第二节 引物设计惑与获
第三节 引物二聚体终于消失了
第四节 PCR扩增实验污染的惨痛教训
第五节 如何减少PCR产物中的引物二聚体
第六节 昙花一现的PCR结果
第七节 如何获得完美的荧光定量PCR结果
第八节 实时荧光定量PCR中荧光定量标准曲线很重要
第九节 MicroRNA的荧光定量PCR检测之我见
第十节 残缺的芯片扫描图
第十一节 “假阳鬼子”和“拦路虎”
第十二节 PCR扩增攻略
第二篇 蛋白质技术
第一章 蛋白质电泳技术
第一节 讨厌的波浪线
第二节 冬天里的一把火
第三节 当头棒喝！蛋白质双向凝胶电泳聚不上焦
第四节 蛋白质双向凝胶电泳横条纹的教训
第五节 蛋白质双向凝胶电泳聚焦后胶条的白色霜状析出
第六节 蛋白质双向凝胶电泳弥散的蛋白质点
第七节 Clean up失效后的思考
第二章 Western blotting方法
第一节 Western-blotting变成了Western-lost
第二节 高背景被“擦”掉了
第三节 “祸起萧墙”——豁然开朗
第四节 蛋白条带不给力
第五节 蛋白抗体不给力
第六节 蛋白抑制剂不给力
第七节 令人费神的磷酸化蛋白的WB检测
第八节 如何使样品间内参趋于一致
第九节 为了那比金子更贵的抗体
第十节 Western Blotting——多个环节需注意
第三章 蛋白质免疫鉴定技术
第一节 都是封闭血清惹的祸
第二节 免疫荧光实验技术之我见
第三节 免疫共沉淀实验的独门秘籍——精选“手术刀”去除免疫球蛋白条带
第四章 蛋白质纯化和蛋白质晶体技术
第一节 试剂说明书不是“金标准”
第二节 沉淀、沉淀，不要再见
第三节 拨开乌云见天日——从蛋白质微晶到晶体
第三篇 细胞技术
第一章 细胞培养的基本技术
第一节 特别的爱给特别的你
第二节 谁动了我的细胞
第三节 如何成功进行大鼠肺动脉平滑肌细胞的体外培养
第二章 细胞污染
第一节 什么污染
第二节 恼人的小黑点
第三节 谁是细胞污染的元凶
第四节 黑胶虫，请别来找我
第三章 细胞活力检测
第一节 “鱼”和“熊掌”不可兼得
第二节 走自己的路，莫轻易盲从
第三节 MTT结晶溶解很重要
第四节 不断探索，寻找最佳实验条件
第四章 细胞凋亡检测
第一节 DAPI染核中细胞固定的重要性
第二节 避免非特异染色
第三节 胰酶消化制备单细胞悬液
第五章 流式细胞术
第一节 是谁悄悄蒙上了你的眼睛
第二节 动态观察，多思多得
第三节 都是染料惹的祸
第六章 相关技术
第一节 “厚此”≠“薄彼”
第二节 向左转？向右转？
第三节 染色体制备心得
第四节 为什么单个核细胞分离得率不高
第五节 如何采用CPT管成功地分离外周血单个核细胞
第四篇 微生物与免疫技术
第一章 微生物技术
第一节 众里寻他千百度——厌氧菌的培养经历
第二节 脂多糖银染的技巧
第三节 关于重复实验的几点看法
第四节 搅拌转速对发酵生产的影响
第五节 都是更换生产品种惹的祸
第六节 发酵罐染菌的原因分析
第七节 快速准确知晓靛基质试验结果的巧方法
第八节 变形杆菌属与其他菌属的分离方法
第二章 免疫技术
第一节 成功中的失败
第二节 阳性对照也很重要
第三节 酶标板今天“唱白脸”
第四节 不要被OD值的大小所迷惑—关于ELISA法检测梅毒假阳性与假阴性的报道
第五节 “即刻法”的前两点
第六节 加样仪惹的祸
第七节 “鱼”与“熊掌”兼得的梅毒检测方法
第八节 人兔和谐，共用抗体
第九节 我的兔子谁做主
第十节 当空白对照不再空白
第十一节 自噬体的检测方法
第五篇 动物技术
第一章 纲举目张 ——建模心得
第一节 实验动物模型选择
第二节 发育损伤模型屡遭失败后的原因探讨
第三节 兔VX2肿瘤模型构建方法改进
第四节 等长收缩时的力量与持续时间问题
第五节 可控水囊的妙用
第六节 急性胰腺炎造模方式的选择
第七节 颌关节定量加力模型的建立始末
第八节 大鼠脑立体放射治疗模型制作
第九节 大鼠放射性肺炎模型的制作
第十节 小鼠肿瘤放疗模型的制作
第十一节 放射性食管损伤模型制作
第十二节 痉挛模型中“撞”来的成功
第十三节 移植排斥需谨慎
第二章 未雨绸缪 ——实验准备
第一节 动物实验前的准备
第二节 纪念降脂实验中牺牲的大鼠兄弟们
第三节 溶血与凝聚实验中血的代价
第四节 吸入染毒装置的改良
第五节 与猫配合的降压实验
第六节 如何进行裸鼠移植瘤的无菌照射
第三章 画龙点睛 ——实验技巧
第一节 柳暗花明又一村——中药体内实验感悟
第二节 可怕的过敏实验
第三节 祛痰实验方法的改进
第四节 如此方便的静脉给药途径
第五节 大动物实验生命体征监测及相应处理的重要性
第六节 小鼠长期多次采血经验荟萃
第七节 浅谈“非标准状态”下大鼠脑定位技巧
第八节 拨出肠管与否对肝切除术后大鼠生存时间的影响
第九节 脑立体定位中轻松插耳杆
第十节 九月份的尾巴是天秤座
第四章 知己知彼 ——动物习性
第一节 剖析行为学实验中容易忽略的细节
第二节 你熟悉实验动物的生活习性了吗？
第三节 向清醒状态下的大鼠脑内给药方法探讨
第六篇 临床检验技术
第一章 临床血液学与临床基础检验技术
第一节 CA500血凝仪遭遇神奇“不凝门”
第二节 LH750血液细胞分析仪异常白细胞分类
第三节 全自动血液分析仪血小板计数误差及处理
第四节 血沉仪使用问题的分析
第五节 血液细胞分析仪白细胞不能分类的祸首是棉絮
第六节 血小板检测的思考
第七节 温度导致血常规结果出现问题
第八节 纤维蛋白原时序性减少的原因分析
第九节 什么导致纤维蛋白原检测结果都偏低
第十节 难以对付的疟原虫厚片染色技术
第十一节 脑脊液沉渣涂片制作巧方法
第十二节 染出满意的血涂片的一点心得
第十三节 前列腺液取不出怎么办
第十四节 巧用尿试纸节省试剂成本
第十五节 高血压三项特殊真空管的制作
第十六节 人精子染色体制备技术
第十七节 如何使用分离胶管制备高质量血清标本
第二章 临床输血检验技术
第一节 肝素抗凝血导致交叉配血不合
第二节 反定型U型板法的惑与获
第三节 O型夫妇为何生出B型儿子？
第四节 交叉配血相合为什么不能发血？
第五节 新配的2-巯基乙醇失效了吗？
第六节 找到致病抗体为何不能发阳性确认报告？
第七节 是阴性？弱D？还是阳性？
第三章 临床生物化学与分子生物学检验技术
第一节 镁离子结果怎么不美了？
第二节 谁对血清镁的结果施了魔法？
第三节 前后的“我”为何不一样
第四节 无机磷异常升高的原因—关于全自动生化仪交叉污染的发现和处理
第五节 血清磷测定结果假性升高原因分析及解决办法
第六节 住院患者怎么都缺钙了？
第七节 HITACHI 7180全自动生化分析仪杯空白报警的惑与获
第八节 UPS电源对生化仪电解质模块的影响
第九节 “回收实验”在样本结果复查中的妙用
第十节 莫名其妙的血钾升高血糖降低—不严格执行SOP记录的教训
第十一节 前清蛋白，你为什么总会出现负值？
第十二节 谁偷走了他们的前白蛋白
第十三节 透过“乳糜”测本质
第十四节 标本存放数天后葡萄糖含量不降反升
第十五节 一份标本，两个医院，结果相差近20倍！
第十六节 风扇的巧妙用处—如何发挥老仪器的余热
第十七节 强生生化350的一个秘密
第十八节 AVL血气分析仪提高试剂使用效率方法探讨
第十九节 ALT与AST分道扬镳谁的错
第二十节 什么让清洗管内堵满了绿色浮云？—关于生化仪清洗管堵塞原因探究和排除的报道
第四章 临床免疫学检验技术
第一节 厂家给的参数就正确吗？
第二节 离奇的“张冠李戴”—关于BN-Ⅱ特定蛋白仪发生结果异常的报道
第三节 失灵的“金标准”
第四节 铁蛋白检测结果异常的分析
第五节 为什么消化道出血的患者粪便隐血结果却为阴性？
第六节 质控正常结果可靠吗？
第七节 同样做校准，结果却不同
第七篇 海外实验室技术
Section 1.Brain slice
Anesthesia
Isolation of Brain Tissue
Cutting
Recording
Summary
References
Section 2.Array-comparative genomic hybridization （arrayCGH）
Extraction of Genomic DNA
Labeling of Genomic DNA
Hybridization
Analysis
FISH and array CGH
References
Section 3.Confocal Microscopy for Live Cell Imaging
Introduction to confocal microscopy
Selection of microscope settings for image optimization
Live cell confocal microscopy imaging
Live cell confocal microscopy applications：
References
Section 4.CoronaryArteryLigation on Mice
Instruments
Anesthesia and Pre-surgical Preparation
Intubation and Ventilation
Left Anterior Descending Coronary Artery Occlusion
Summary
References
Section 5.Decerebration in Rodents
General Surgical preparation
Decerebration
Trouble shooting
Summary
References
Section 6.In-situ Carotid Sinus Nerve Electrophysiological Recordings
Electrodes
Surgical isolation of the carotid sinus nerve
Recording electrical activity
Identify chemosensory discharges from carotid baroreceptors activity
Summary
References
Section 7.Extracellular Single-unit Recordingin viv
Reduce the impact of background noise
Animal preparation
Extracellular single-unit recording and Histology
Data analysis and Results
Summary
References
Section 8.Fluorescence in-situ Hybridization on Formalin-fixed，Paraffin-embedded Tissue Sections
Sample Pretreatment
Denaturation and dehydration
Hybridization
Quality control
References
Section 9.Isolation and Culture of Alveolar Macrophage and Peritoneal Mast Cell
Bronchoalveolar lavage（BAL）and culture of AMø
Isolation and culture of peritoneal MCs
Summary
References
Section 10.Acute Renal Nerve ActivityRecording on an Anesthetized Rat
References
Section 11.Renal Blood Flow Recordingin an Acute Anesthetized Preparation
References
Section 12.Chromatin Immunoprecipitation
References
Section 13.PCR/RT-PCR/Q-PCR
References
Section 14.Single-Fiber Recordingof Skeletal Muscle Afferents
Connecting to ground and setting the recording parameter
Surgical exposure of skeletal muscle afferents
Identify the receptive field of muscle afferents
Identify groupⅢandⅣby measuring the conduction velocity
Characteristics of GroupⅢand GroupⅣafferents
Summary
References
Section 15.Co-Immunoprecipitation and Western BlottingTechniques
References
实验技术中的“惑”与“获”是2013年由人民卫生出版社出版,作者顾兵 主编。
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